Zestaw ELISA do oznaczania przeciwciał przeciwko cyklicznemu cytrulinowanemu peptydowi (CCP)

Zestaw ten wykrywa przeciwciała przeciwko cyklicznemu cytrulinowanemu peptydowi (przeciwciała CCP) w próbkach surowicy ludzkiej metodą pośrednią, wykorzystując oczyszczone antygeny cyklicznego cytrulinowanego peptydu jako antygen powłokowy.

Proces testowania rozpoczyna się od dodania próbki surowicy do studzienek reakcyjnych, które zostały wstępnie pokryte wyżej wymienionymi oczyszczonymi antygenami, a następnie inkubacji. Podczas inkubacji, jeśli w próbce obecne są przeciwciała CCP, rozpoznają one i wiążą się z cyklicznymi cytrulinowanymi antygenami peptydowymi pokrytymi na mikrostudzienkach, tworząc stabilne kompleksy antygen-przeciwciało. Aby zapewnić dokładność kolejnych etapów, niezwiązane składniki w studzienkach reakcyjnych są usuwane w procesie płukania, co pomaga wyeliminować potencjalne zakłócenia ze strony innych substancji obecnych w surowicy.

Następnie do studzienek reakcyjnych dodaje się koniugaty enzymatyczne. Po drugiej inkubacji, koniugaty te specyficznie wiążą się z istniejącymi kompleksami antygen-przeciwciało, tworząc większy kompleks immunologiczny, który zawiera antygen, przeciwciało i koniugat enzymatyczny. Po wprowadzeniu do układu roztworu substratu TMB, enzym w koniugacie katalizuje reakcję chemiczną z substratem TMB, powodując widoczną zmianę koloru. Intensywność tej reakcji barwnej jest bezpośrednio związana z ilością przeciwciał CCP obecnych w oryginalnej próbce surowicy. Na koniec, czytnik mikropłytek mierzy absorbancję (wartość A) mieszaniny reakcyjnej. Analizując tę wartość absorbancji, można dokładnie określić poziom przeciwciał CCP w próbce, co stanowi wiarygodną podstawę do odpowiednich badań klinicznych i diagnozy.